什么叫做薄层色谱法的原理 什么叫做薄层色谱法的定义

什么叫做薄层色谱法?

答:薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。

延伸阅读

薄层色谱操作步骤?

1.吸附剂和展开剂的选择

  (1) 吸附剂:常用有硅胶、氧化铝、聚酰胺、硅藻土等。硅胶、氧化铝的活性与含水量有关,含水量高,活性低,吸附力弱;聚酰胺表面的酰胺基可形成氢键,选择性高。

  (2) 展开剂:极性较强的展开剂适用于极性较强组分的洗脱;极性较弱的展开剂适用于极性较弱组分的洗脱。加入少量酸、碱可以使极性物质斑点集中,减少拖尾,提高分离度。

  选择一般原则是,分离极性较强组分时选用活性低的薄层板,以极性强的展开剂展开。分离弱极性组分时,宜选用活性高的薄层板,以极性弱的展开剂展开。调整待测组分Rf0.3~0.5范围内。

  2.薄层板制备:1份固定相与3份水混和涂布,110℃烘30分钟。

  3.点样与展开:点样一般为直径2~4mm圆点,距底2.0cm;展开距离一般为10~15cm.

  4.斑点定位:有色可直接观察;有荧光在紫外灯下观察;喷洒显色剂使组分显色。

薄层色谱法中展开剂如何选择?

1、结合从疏水到亲水性的有机RT序列表,根据活性物质的性质(疏水性、两性、亲水性)来选择合适的流动相。

2、流动相要对分离的物质具有一定的溶解度。

3、展开剂的极性应该比分离的物质的极性略小。

4、展开剂和吸附剂要有一定的亲和力。

薄层层析展开剂的选择依据是什么

薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。

此外,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。

薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离。

另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。此外,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。 薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上,凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

薄层色谱法的具体操作?

一:我们的薄层板制备,我们大家是要将1份的固定相和我们3份的水,在研钵中顺时针研磨和混合。

二:薄层板的活化,就是硅胶板在105-110℃烘上大概是30分钟的时间,而氧化铝板是150-160℃的。

三:就是点样,我们的点样的方式就是我们就分为手动点样和自动点样,我们大家在手动点样的主要器具就为微量毛细管。

四:就是展开,我们大家在展开剂的配制,就是配制展开剂的时候,我们要去严格的控制其比例的准确度。

薄层色谱法中Rf值指的是什么?

薄层色谱法中Rf值指薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值 。

Rf=溶质移动的距离/溶液移动的距离。表示物质移动的相对距离。各种物质的Rf 随要分离化合物的结构,滤纸或薄层板的种类、溶剂、温度等不同而不同,但在条件固定的情况下,Rf对每一种化合物来说是一个特定数值。

薄层色谱怎么分析结果?

薄层色谱分析结果:1.制板。制板的意思是均匀地把吸附剂涂抹一层在干净的玻璃板上。2.点样。点样就是将经过处理后的样本滴在制作好的玻璃板上。3.展开。展开是指将滴有样本的玻璃板放进展开剂中。4.检出。检出是待玻璃板干燥后,使用显色剂显出斑点进行检测。在整个分析过程中,检测者一定要准备好所需的检测设备和材料,认真细致地完成整个过程,形成正确有效的分析报告。

薄层色谱分析有哪些注意事项?

第一,制板的匀浆。首先,制板时使用的匀浆稀稠要适中。使用的匀浆太稠或者太稀都会影响后续的分析结果。因此,检测者一定要根据使用匀浆的种类按照科学的比例进行配制,为后面的检测环节打好基础。

第二,使用的点样管。在点样的过程中,检测者所使用的点样管越小越好。越小的点样管点的斑点会越小,之后展开的色谱图效果也会更好。

第三,展开剂的配制。检测者在配制展开剂的时候,一定要将使用的各种溶剂混合均匀。检测过程中一旦使用了混合不均匀的展开剂,就会导致整个分析过程的失败。因此,检测者一定要引起高度重视。

第四,温度。在分析过程中,温度也会对分析结果产生影响。一般来说,温度越低相对越好。因为有些样本只有在低温条件下才能进行分离。

试验中薄层色谱步骤具体是什么?

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上,晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。

待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

薄层色谱法实验步骤?

步骤一:薄层板制备

除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。手工制板一般分不含粘合剂的软板和含粘合剂的硬板俩种。

步骤二:薄层板的活化。硅胶板于105-110℃烘30分钟,氧化铝板于150-160℃烘4小时,可得活性的薄层板。

步骤三:点样

点样方式:分为手动点样和自动点样。手动点样主要器具为微量毛细管、微量注射器等。自动点样采用半自动点样仪或全自动点样仪,按预设程序自动点样。手动点样灵活方便,常用于各种TCL鉴别中,器具以微量毛细管最常用。仪器的自动点样准确性好,常用于薄层扫描法的含量测定。

点样方法:分为接触式点样和喷雾点样。喷雾点样为仪器控制,在此不展开描述。接触式手工点样时,应注意小心用点样器垂直接触薄层板表面以防止损伤板面。若薄层吸附剂表面被损坏或点成洼孔,则展开后斑点成不规则形状;靠近溶剂前沿的化合物形成三角形,靠近原点的化合物形成新月形,影响测定结果。原点损失带来误差,也将使展开后的定量和判断不准确。

步骤四:展开

展开剂的配制:配制展开剂时,应严格控制其比例准确度,如遇到比例很小的溶剂时,应尽量满足其精确度要求,而不是为图方便省事直接用滴管加入。展开剂配好后如果浑浊不清,不能立即使用。应转移入分液漏斗中,待其静置分层澄清后再取其上层(或下层)液进行展开。

步骤五:显色

薄层板显色方法有哪些?主要有三种方法,分别是蒸汽显色法、物理显色法和试剂显色法。

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